Hématocrite non automatisé
(Microméthode)
(Microméthode)
DÉFINITION
L'hématocrite est défini comme le volume occupé par les hématies dans une quantité de sang total connue.
La plupart des automates calculent l'hématocrite.
Dans les cas où les automates ne peuvent le calculer, essentiellement lorsque le nombre de globules rouges et le volume globulaire moyen (VGM) sont faussés par la présence d'une agglutinine froide, on utilise une méthode directe manuelle.
MÉTHODE
Elle consiste à centrifuger le sang dans un microtube en verre de dimensions définies (longueur : 75 mm, diamètre intérieur : 1 mm). (c’est le tube de wintrobe)
Cet examen peut être réalisé à partir d'un prélèvement veineux recueilli sur EDTA ou directement à partir d'un prélèvement capillaire; dans ce cas on utilise des microtubes héparinés.
* Laisser monter le sang par capillarité, en évitant les bulles d'air, dans le tube à microhématocrite. Remplir au moins les deux tiers du tube pour faciliter la lecture.
* Boucher une des extrémités du tube avec de la pâte à sceller (ou par la flamme) ;
* Placer le tube dans l'une des fentes du rotor d'une microcentrifugeuse prévue à cet effet, en s'assurant que le côté bouché est situé vers l'extérieur de la centrifugeuse.
* Centrifuger à vitesse élevée (14 000 g) pendant 5 minutes.
Exemples de tubes après centrifugation.
Lecture
Exemple de lecture de microhématocrite. On utilise un abaque de lecture. Après centrifugation, le tube à hématocrite est placé dans son emplacement; la base du sang est ajustée sur le zéro de la réglette (2); on fait glisser le support soutenant le tube afin de superposer le ménisque sur le trait correspondant au 100 % (3); on relève le pourcentage correspondant à la séparation entre la partie plasmatique et globulaire (dans cet exemple : 49 %)
VALEURS DE RÉFÉRENCE
*homme : 47±7%
*femme : 41±6%
*enfant : 40±4%
*nouveau né : 53±9%
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