réalisation d'un frottis sanguin
Coloration de May-Grünwald-Giemsa
Principe
Le colorant de May-Grünwald est une solution neutre d'éosine et de bleu de méthylène dans de l'alcool méthylique, ce qui permet la fixation des éléments. Lorsqu'on utilise ce colorant isolément, les noyaux sont colorés en bleu pâle, les cytoplasmes en bleu très clair ou sont incolores, les granulations secondaires des granulocytes en rouge clair pour la lignée neutrophile, en bleu foncé pour la lignée basophile et en rouge-orangé pour la lignée éosinophile. Les hématies sont colorées en beige rosé.
Le colorant de Giemsa est une combinaison d'éosine et de dérivés du bleu de méthylène dont l'azur. Il colore les noyaux en violet, les cytoplasmes en bleu plus ou moins intense ou en rose selon les cellules et les granulations primaires des granulocytes en rouge-pourpre intense (granulations dites alors azurophiles).
Méthode
On peut déposer les colorants sur les lames disposées à plat ou plonger les lames verticalement dans un bac à coloration:
*May-Grünwald pur : 2 minutes
*eau tamponnée pour le rinçage (ou eau de robinet)
*Giemsa dilué au 1/10 en eau tamponnée
*eau pour le rinçage
Essuyer si besoin est le dos des lames avec un essuie-tout non pelucheux et laisser ensuite les lames égoutter et sécher à l'air au moins 5 minutes avant de les examiner au microscope.
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